研究报告
崔长征,沈萍,张甲耀,冯耀宇,林匡飞.利用绿色荧光蛋白标记革兰氏阴性细菌的研究[J].环境科学学报,2011,31(2):276-282
利用绿色荧光蛋白标记革兰氏阴性细菌的研究
- Labeling gram-negative bacteria using green fluorescent protein
- 基金项目：国家博士后特别资助基金项目(No.200902093)
- 作者
- 单位
- 崔长征
- 华东理工大学资源与环境工程学院国家环境保护化工过程环境风险评价与控制重点实验室, 上海 200237
- 沈萍
- 武汉大学生命科学学院, 武汉 430072
- 张甲耀
- 武汉大学资源与环境科学学院, 武汉 430072
- 冯耀宇
- 华东理工大学资源与环境工程学院国家环境保护化工过程环境风险评价与控制重点实验室, 上海 200237
- 林匡飞
- 华东理工大学资源与环境工程学院国家环境保护化工过程环境风险评价与控制重点实验室, 上海 200237
- 摘要：构建了具有不同抗性且能够组成型表达绿色荧光蛋白的一系列转座子质粒pTnMod-OCm-G、pTnMod-OTc-G、pTnMod-OKm3-G和pTnMod-OGm-G,并通过三亲本杂交的方法,成功地将荧光蛋白基因分别插入到多环芳烃降解菌株Sphingomonas sp.12A和Pseudomonas sp.12B的基因组内,获得了具有降解多环芳烃特性,同时在没有抗生素选择压力下连续传代多次仍能够稳定组成型表达荧光的转化子.结果表明,该系列转座子不仅适合其它革兰氏阴性菌的遗传标记,也为进一步研究降解菌在污染环境中的存活能力和生态安全奠定了基础.
- Abstract：In this study,four transposable plasmids were constructed,pTnMod-OCm-G,pTnMod-OTc-G,pTnMod-OKm3-Gand pTnMod-OGm-G,which can constitutively express green fluorescent protein. Via triparental mating,the GFPgene was inserted into genomes of Sphingomonas sp. 12Aand Pseudomonas sp. 12B,two polycyclic aromatic hydrocarbons-degrading bacterial strains. The transformants,which can degrade polycyclic aromatic hydrocarbons,can constitutively express GFPwithout the presence of antibiotics through many generations of propagation. The transposons can be transferred to other gram negative bacteria and expressed stably. Therefore,they have potential to be used in research on bacterial survival and ecological safety in contaminated environments.
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