2. 中国科学院西北生态环境资源研究院, 冰冻圈科学国家重点实验室, 青藏高原冰冻圈观测研究站, 兰州 730000
2. Cryosphere Research Station on the Qinghai-Tibetan Plateau, State Key Laboratory of Cryosphere Sciences, Northwest Institute of Eco-Environment and Resources, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou 730000
碳作为一种生源要素, 参与了生态系统大部分的生物地球化学循环过程.颗粒态有机碳 (Particulate Organic Carbon, POC) 和溶解性有机碳 (Dissolved Organic Carbon, DOC) 是水体有机碳的2种赋存形式.有研究表明, 在贫营养的马尾藻海, 透光带蓝藻生物量的10%形成了POC (Lomas et al., 2011).此外, 在海洋生态系统中, 9%的POC能被浮游动物摄食 (Lampitt, 1992).因此, POC与“生物泵”过程有着密切的联系, 是生物代谢-摄食中的主体.
湖泊是内陆水体的重要组成部分, 在全球碳循环中具有重要作用 (Tranvik et al., 2009).太湖是典型的富营养化浅水湖泊, 近年来蓝藻水华频发.由于蓝藻能形成群体胶鞘, 降低了被浮游动物摄食的可能 (孔繁翔等, 2005), 从而影响POC在食物网中的碳素传递效率 (Leonard et al., 2005; Mao et al., 2012).那么, 太湖蓝藻水华过程是否会对水体中POC的含量产生影响进而改变食物网的碳素循环规律?基于此, 本文以太湖重度蓝藻水华发生的西北湖区为研究对象, 逐月采集表层水体和浮游植物样品, 分析表层水体中POC和DOC含量、水温、蓝藻生物量和总细菌丰度, 以明确POC在表层水体有机碳中的季节变化规律, 并进一步测定颗粒态有机物 (Particulate Organic Matter, POM) 的碳稳定同位素特征值和碳氮比, 揭示POC的内源和 (或) 外源来源特征, 从而厘清影响POC含量变化的生物地球化学反应过程, 明确其在太湖西北湖区表层水体的来源与归趋, 并为进一步通过生物操控进行富营养化湖泊的治理和碳循环研究提供重要参考依据.
2 材料与方法 (Materials and methods) 2.1 研究区域与采样方法太湖蓝藻水华主要发生在西北湖区 (刘聚涛等, 2011), 因此, 本文以西北湖区为研究对象, 从河口至湖心设置5个采样点, 其中, S1和S5位于河口区, 靠近入湖河流尹村港和陈东港, 2条河流入湖总水量分别在环太湖的13条主要河流中位于第3和第1(石亚东等, 2012);S4位于湖心区.用GPS定位系统对研究区域采样点精确定位 (图 1), 于2012年9月至2013年8月, 每月采集水体表层样品.细菌样品用37%甲醛固定, 水样置于有冰袋的保温箱中在4 h内带回实验室做进一步处理.
使用多参数水质分析仪 (YSI Professional Plus) 记录水温.1 L水样中加入10 mL鲁哥固定, 在实验室沉淀浓缩至30 mL, 倒置显微镜 (Zeiss Axiovert 135) 下进行鉴定和计数, 蓝藻的鉴定方法参照《中国淡水藻类:系统、分类及生态》.根据蓝藻个体形状参数和细胞数计算蓝藻细胞体积, 再乘以密度得到蓝藻生物量 (邓建明等, 2011).DAPI (4′, 6-二脒基-2-苯基吲哚) 染色, 用表面荧光显微镜 (Zeiss Axiovent 135 M, Germany) 测定总细菌丰度.
经Whatman (GF/F, 5 h, 450 ℃) 滤膜过滤水样, 滤膜用浓盐酸熏蒸去除无机碳后使用元素分析仪 (Euro EA3000) 测定POM的碳氮比和POC含量.使用同位素质谱仪 (Thermo FinniganMAT Deltaplus) 测定δ13CPOM.滤液用1 mol·L-1 HCl酸化后使用TOC分析仪 (MultiN/C3100TOC/TN) 测定DOC含量.
2.3 数据处理5个采样点所有参数使用SPSS16.0软件进行多样本非参数检验 (Kruskal-Wallis), 显著性水平p=0.05.POC含量及其来源参数与环境因子使用皮尔森 (Pearson) 相关系数法进行相关性分析.
3 结果与分析 (Results and analysis) 3.1 水温、蓝藻生物量和总细菌丰度的时空变化太湖西北湖区水温、蓝藻生物量和总细菌丰度的时空变化如图 2所示, 其中, 水温周年变幅为3.90~30.58 ℃, 最低和最高温度分别出现在2013年1月和7月.蓝藻生物量波动较大, 2个峰值分别出现在2012年11月的S3点位 ((2.28±0.30) mg·L-1) 和2013年8月的S1点位 ((2.06±0.10) mg·L-1).5个采样点的水温 (p=0.9, n=60)、蓝藻生物量 (p=0.9, n=55) 和总细菌丰度 (p=0.5, n=55) 均没有显著差异.总细菌丰度从2012年9月至2013年1月逐渐减少, 然后波动增加, 在2013年5月S5点位达到最大值 (1.01×107±7.00×105) cells·mL-1.
太湖西北湖区表层水体POC和DOC含量的时空变化如图 3所示.由图 3可知, POC含量的季节变幅为 (0.49±0.03)~(30.86±2.00) mg·L-1.其中, 2012年11月—2013年3月, POC含量较低, 最大值为 (6.78±1.0) mg·L-1;2013年4—8月, POC含量较高, S1和S5点位的POC含量在2013年4月和8月都超过了10 mg·L-1.5个采样点POC含量没有显著差异 (p=0.5, n=48)(2012年9月、10月, 5个采样点POC数据丢失, 2012年12月和2013年1月S2点位POC数据丢失).但对河口区S5与湖心S4进行配对t检验, 发现两点POC含量具有显著差异 (p < 0.05, n=10).DOC含量的周年变幅为 (2.89±0.10)~(6.85±0.35) mg·L-1.5个采样点DOC含量具有显著差异 (p < 0.01, n=60).POC在有机碳中 (POC+DOC) 所占比例变幅为8.54%~84.96%.
δ13CPOM变幅为-32.52‰±0.24‰~-19.65‰±0.12‰.S1和S4点位δ13CPOM从2012年9月至2013年2月逐渐降低, 5个采样的δ13CPOM从2013年3月至8月逐渐增大.POM的碳氮比变幅为7.12±1.00~14.10±1.50, 从2012年10月至2013年2月, 5个采样点的碳氮比迅速降低.5个采样点δ13CPOM(p=0.8, n=57) 和碳氮比 (p=0.2, n=55) 均没有显著差异.秋、冬季 (2012年9月—2013年2月)δ13CPOM显著低于春、夏季 (2013年3—8月)δ13CPOM(p < 0.001, n=57).秋、冬季POM碳氮比显著高于春、夏季碳氮比 (p < 0.001, n=55).
POC含量和来源参数与环境因子的相关分析结果见表 1.由表 1可知, POC含量和δ13CPOM与蓝藻生物量、总细菌丰度和水温均显著正相关.
太湖西北湖区表层水体的POC浓度平均值为 (4.66±5.37) mg·L-1, 这与姜广甲等 (2015)在太湖的梅梁湾和竺山湾表层水体的研究结果 (2.94±3.87) mg·L-1基本一致.有研究表明, 湖泊水体中有机碳的含量与湖泊的营养水平密切相关 (Johengen et al., 1994).与新疆的博斯腾湖表层水体POC含量的平均值 (0.97±0.51) mg·L-1相比 (王秀君等, 2014), 太湖西北湖区表层水体POC含量较高, 可能的原因是太湖水体的叶绿素和营养盐浓度较高, 本研究发现, 太湖西北湖区表层水体蓝藻生物量最高达到2.30 mg·L-1.此外, 受浮游植物生物量的影响, 湖泊水体中POC含量变化范围较DOC大 (Kim et al., 2000).本文也发现相同规律, 表明蓝藻水华过程对太湖西北湖区表层水体POC的影响较DOC大.
一般认为, 湖泊水体中有机碳的主要组分是DOC (Tranvik et al., 2009).本研究发现, 太湖西北湖区5个采样点POC在有机碳中所占比例的均值为39.80%±21.00%, 其中, 在2013年4月和8月, POC/DOC大于1.研究表明, POC含量与悬浮物浓度显著正相关 (刘庆霞等, 2012), 在韩国Soyang湖的研究发现, 由于降雨产生大量悬浮物进入水体后导致水体DOC/POC降至0.8(Kim et al., 2000).在西江流域也发现汛期水体DOC/POC降至0.5(Sun et al., 2010).而太湖流域5—9月为汛期, 因此, 推测降雨产生的悬浮物会引起水体POC/DOC升高.此外, 太湖属于典型的浅水型湖泊, 风浪扰动也会引起沉积物再悬浮, 并且有研究表明, 太湖春季和夏季风速较高约为4.90 m·s-1(王震等, 2016).但沉积物再悬浮也会引起间隙水中DOC的释放 (Otto et al., 1998).因此, 在后续研究中还需要通过室内模拟实验来比较POC和DOC在沉积物再悬浮过程中的释放通量, 从而明确沉积物再悬浮是否是太湖西北湖区表层水体DOC/POC升高的原因之一.
4.2 POC含量的季节变化规律已有研究表明, POC含量具有明显季节变化规律 (Dunalska et al., 2004).本文研究发现, 太湖西北湖区表层水体POC含量的季节变化规律明显, 两个峰值分别出现在春季和夏季, 这与福建筼筜湖的研究结果一致 (林静毅等, 2011).由于浮游植物在生长过程中对碳的需求量较高, 温度升高会促进藻类生长速率增加, 藻类水华的发生会引起表层水体POC含量的显著升高 (Muylaert et al., 2005).本文中表层水体POC含量与水温、蓝藻生物量均显著正相关, 这与在波罗的海的研究结果一致 (Maciejewska et al., 2014), 表明水温、蓝藻生物量是影响表层水体POC含量的重要因素.但鉴于太湖水体表层湖流和风力作用使得蓝藻易在西北湖区堆积 (吴挺峰等, 2012), 本研究发现, 5个采样点的蓝藻生物量并没有显著差异.POC含量的差异也仅存在于河口区S5和湖心区S4之间, 这可能与S5点位靠近入湖河流量最大的陈东港有关.此外, 有研究表明, 细菌也是水体POC的重要来源 (Azam et al., 1992).在St. Lawrence河口研究发现, 浮游细菌和附着细菌生物量均与POC含量显著正相关 (Painchaud et al., 1989).太湖细菌主要以附着细菌存在 (宋玉芝等, 2013), 因此, 本文中总细菌丰度与表层水体POC含量也显著正相关.
4.3 西北湖区表层水体POC的来源解析本文中δ13CPOM的值域与已报道的太湖δ13CPOM(-35.4‰~-22.2‰) 变化范围一致 (Zeng et al., 2008), 但变幅与瑞典Örträsket湖 (-26.3‰~-27.2‰) 相比较大 (Jonsson et al., 2001), 表明影响太湖δ13CPOM的因素、POC的来源及其生物地球化学过程比较复杂.
湖泊水体中有机碳分的来源包括内源和外源, 其中, 内源是水体中浮游植物光合作用的直接和间接产物, 因此, 与浮游植物有密切关系.有研究表明, 水温、浮游植物生物量与δ13CPOM显著正相关 (Gu et al., 2006), 本文研究发现, 太湖西北湖区表层水体秋、冬季δ13CPOM显著低于春、夏季, δ13CPOM与水温、蓝藻生物量和浮游细菌数量均显著正相关, 表明水温、蓝藻生物量和浮游细菌数量是影响太湖δ13CPOM的重要因素, 这些因素的季节变化会对δ13CPOM和POC的来源产生影响.有研究表明, 在富营养化水体中浮游植物光合作用初级生产力对POC的贡献超过80%(Pace et al., 2007), 但冬季随着初级生产力的降低, POC以外源来源为主 (Lehmann et al., 2004).有研究表明, 太湖微囊藻即内源来源端元碳稳定同位素特征值约为-20.9‰(de Kluijver et al., 2012), 外源来源端元特征值为-27‰(Zeng et al., 2008).本研究发现, 太湖西北湖区表层水体δ13CPOM均值为-25.90‰±6.37‰, 介于2个来源端元之间, 表明POC的内源和外源混合的来源特征, 但不同季节、不同点位之间由于受蓝藻生物量、入湖河流等因素影响还存在一定的差异.2013年6月S3(-20.9%)、S5(-19.7%) 及8月S1(-21.0%) 点位的δ13CPOM与微囊藻的碳稳定同位素特征值接近, 表明蓝藻是夏季太湖西北湖区表层水体POC的主要来源.2013年1月S4(-26.8%) 和S5(-26.9%) 及2月S5(-26.8%) 点位的δ13CPOM与外源来源端元特征值接近, 表明外源来源是太湖西北湖区冬季表层水体POC的主要来源.但冬季S1点位δ13CPOM碳稳定同位素特征值均小于-29.5‰, 这与已报道过的太湖贡湖湾冬季高等水生植物凤眼莲 (-29.13%) 的碳稳定同位素特征值比较接近 (温周瑞等, 2016), 这些研究结果表明, 冬季河口区表层水体POC的主要来源存在差异, 在后续研究中, 还需要运用多端元混合模型来明确POC的主要来源.
不同来源有机物的碳氮比存在明显差异, 因此, POM的碳氮比也可以用来判断POC的来源.水体中浮游植物的碳氮比介于7.7~10.1之间 (Cifuentes et al., 1996), 而陆地高等植物的碳氮比通常高于15(Kendall et al., 2001).在日本Baikal湖研究发现, POM的碳氮比为7.90±2.40, 表明浮游植物是POC的主要来源 (Yoshioka et al., 2002).在韩国Paldang湖研究发现, 春季内源来源是POC的主要来源, POM碳氮比低于6.2, 汛期外源性POC的输入使得该比值升高达到22.9(Park et al., 2009).本文也发现POM碳氮比具有季节变化规律, 秋、冬季高于春、夏季, 但年平均值较低为9.36±2.80, 表明了POC具有内源来源特征.
有研究表明, 河流沉积物中细菌数量与POM的碳氮比显著负相关 (Fischer et al., 2002), 本文也发现相同规律, 表明细菌降解POM是影响其碳氮比的重要因素.但由于有机物在降解过程中碳氮比会发生变化.因此, 通常结合POM碳氮比和δ13CPOM的变化来解析POC的来源.结合上文通过碳稳定同位素特征值得到外源和内源输入是POC的重要来源, 因此推测, 太湖西北湖区表层水体较低的碳氮比可能是内源来源POC与外源性POC被生物降解的结果.
5 结论 (Conclusions)1) 太湖西北湖区表层水体POC含量的变化范围为 (0.49±0.03)~(30.86±2.0) mg·L-1, 冬季POC含量较低, 春季和夏季POC含量达到最大值.河口区靠近入湖河流陈东港的S5与湖心S1点位具有显著差异.DOC含量的变化范围为 (2.89±0.10)~(6.85±0.35) mg·L-1, 5个采样点DOC含量具有显著差异.太湖西北湖区表层水体POC含量的变幅较DOC大, POC在有机碳中 (POC+DOC) 所占比例变幅为8.54%~84.96%, 降雨冲刷作用产生的悬浮物随着地表径流进入水体可能是引起汛期POC/DOC升高的重要原因.
2) POC含量与水温、蓝藻生物量和总细菌丰度显著正相关, 表明蓝藻和细菌是西北湖区表层水体POC的来源之一.西北湖区秋、冬季δ13CPOM显著低于春、夏季, 均值为 (-25.9‰±6.37‰), 介于太湖微囊藻和外源来源端元的碳稳定同位素特征值之间, 表明内源和外源来源都是POC的重要来源, 其中, 夏季主要来源是内源来源, 并且冬季S1点POC也具有内源来源特征, 但冬季S5点POC具有外源来源特征. POM的碳氮比秋、冬季较春、夏季高, 均值为9.36±2.80, 指示了POC的内源来源特征.此外, POM的碳氮比与总细菌丰度显著负相关.因此, 较低的碳氮比可能是内源来源POC与外源性POC被生物降解的结果.
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